Анти-стрептолизин О (АСО)
ПРИНЦИП МЕТОДА
Сывороточный антистрептолизин О (АСО) в концентрации 200 МЕ/мл или выше вызывает видимую агглютинацию на слайде суспензии латексных частиц, покрытых стрептолизином О1.
СОСТАВ
А. Реагент: Суспензия белых латексных частиц покрытых стрептолизином О, азид натрия 0,95 г/л. Чувствительность препарата составляет около 200 МЕ/мл.
С+. Положительный контроль. Сыворотка человека, азид натрия 0,95 г/л.
С-. Отрицательный контроль. Сыворотка, содержащая АСО в концентрации меньше 200 МЕ/мл
Компоненты человеческого происхождения были проверены на отсутствие антител к HIV и HCV, а также и к Hbs – антигену. Однако, следует проявлять осторожность при работе с реагентами, как потенциальным источником инфекций.
Одноразовые мешалки.
ХРАНЕНИЕ
Хранить компоненты при 2-8°С, исключая карточки и мешалки, которые могут храниться при комнатной температуре.
Реагенты и контроли стабильны до окончания срока годности, отмеченных на этикетках флаконов при хранении плотно закрытыми и избежании загрязнения во время использования.
Показатели загрязнения:
Реагент: Видимая агглютинация во флаконе
Контроли: Присутствие взвешенных частиц
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Механический смеситель, скорость вращения до 100 об/мин
ОБРАЗЦЫ
Сыворотка, собранная по стандартной процедуре. Стабильность составляет 7 дней при 2-8 C.
ПРОЦЕДУРА
1.Нагреть реагенты и образцы до комнатной температуры (примечание 2).
2.Поместить 50 мкл образца и 1 каплю каждого Контроля в лунки на слайде.
3.Осторожно перемешать флакон с латексом (А). Держа флакон вертикально осторожно добавить 1 каплю реагента А в каждую лунку рядом с образцом.
4.Перемешать одноразовой мешалкой и распределить по всей поверхности, ограниченной кольцом. Использовать новую мешалку для каждого образца.
5.Поставить слайды в ротатор на 100 об/мин на 2 минуты.
ЧТЕНИЕ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ
Проверить визуально слайды после смешивания (удаления из ротатора) в течение одной минуты на наличие или отсутствие агглютинации. (примечание 3).
Положительные результаты: Присутствие видимой агглютинации выявляется при содержании анти-стрептолизина ?200 МЕ/мл. Сыворотку, показавшую положительный результат, можно оттитровать. Для этого сделать двухкратные разведения с 9 г/л физиологическим раствором. Самое большое разведение сыворотки, показавшее положительный результат, является титром сыворотки, в которой приблизительный уровень АСО можно рассчитать, умножив титр сыворотки на предел чувствительности (200 МЕ/мл).
Отрицательные результаты: Отсутствие видимой агглютинации, выявляется при содержании АСО в сыворотке ниже 200 МЕ/мл.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Положительный С+ и отрицательный С- контроли, поставляемые в наборе, должны тестироваться совместно с образцами пациентов для верификации процедуры.
Положительный контроль С+ показывает ясно видимую агглютинацию латексных частиц.
Отрицательный контроль С- не вызывает агглютинации латексных частиц.
Каждая лаборатория должна устанавливать собственные схемы внутреннего контроля качества и вносить коррективы в случае, если контроль качества не укладывается в допустимые пределы.
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Предел определения: 200 МЕ/мл АСО, при использовании внутреннего стандарта, прослеженного по Референсному биологическому материалу 97/662 (Национального института Биологических стандартов и контролей, Великобритания). Величина cut-off может варьировать до 20% в зависимости от неконтролируемых вариаций измерительной процедуры и опыта оператора в учете результатов.
Эффект высокой дозы (эффект зоны): Ложно отрицательные результаты отсутствуют, по меньшей мере до значений концентрации 800 МЕ/мл АСО. Ложные результаты: Результаты, полученные с данными реагентами не показывают значительных различий при сравнении с референсными реагентами. Детали эксперимента предоставляются по запросу.
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Антистрептолизин О (АСО) является специфическим антителом к стрептолизину О, внеклеточному ферменту, продуцируемому ?-гемолитическими стрептококками (Sreptococcus pyogenis). Антитела к стрептолизину О могут определяться в течение от недели до месяца при стрептококковой инфекции. Стрептококк вызвыает широкий ряд заболеваний верхних дыхательных путей, таких как острый фарингит. Другие манифестации стрептококковой инфекции включают в себя гломерулонефриты, ревматоидные лихорадочные состояния, бактериальный эндокардит и скарлатинну4,7.
Клинический диагноз не должен основываться только на данных единичного теста, а должен включать в себя как клинические, так и лабораторные данные.
ПРИМЕЧАНИЕ
1.Слайды, которые могут использоваться повторно, должны быть тщательно промыты проточной и дистиллированной водой, свободной от всех детергентов.
2.Чувствительность теста может уменьшиться при снижении температуры.
3.Задержка в чтении результатов может привести к ложноположительным результатам АСО.
