Ревматоидный фактор (РФ)
ПРИНЦИП МЕТОДА
Сывороточный ревматоидный фактор вызывает видимую агглютинацию на слайде суспензии латексных частиц, покрытых человеческим гамма-глобулином1,2.
СОСТАВ
А реагент: Суспензия латексных частиц с человеческим гамма-глобулином, азид натрия 0,95 г/л. Чувствительность теста составляет 30 МЕ/мл.
С+. Положительный контроль. Сыворотка человека, содержащая РФ >30 МЕ/мл
С-. Отрицательный контроль. Сыворотка, содержащая РФ<30 МЕмл
Компоненты человеческого происхождения проверены и найден отрицательный результат на присутствие антител к анти – HIV и анти – HCV, также, как и на Hbs – антиген. Однако следует проявлять осторожность с данным реагентом из-за возможного наличия каких-либо других инфекций
Карточки теста. (Примечание 1).
Одноразовые мешалки.
ХРАНЕНИЕ
Хранить компоненты при 2-8 С, карточки и мешалки могут храниться при комнатной температуре.
Реагенты и контроли стабильны до срока годности, указанной на этикетке, при хранении плотно закрытыми и избежании загрязнения во время использования.
Показатели загрязнения:
Реагенты: Видимая агглютинация во флаконе
Контроли: присутствие взвешенных частиц
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ
Реагенты поставляются готовыми к использованию
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Механический ротатор, до 100 об/мин.
ОБРАЗЦЫ
Сыворотка, собранная по стандартной процедуре. Стабильность составляет 2 дня при 2-8 ?C.
ПРОЦЕДУРА
1.Нагреть реагенты и образцы до комнатной температуры (примечание2).
2.Поместить 50 мкл образца и 1 каплю каждого Контроля в лунку на карточке теста.
3.Осторожно перемешать флакон с латексом (А) перед использованием. Держа флакон А вертикально добавить 1 каплю реагента А в каждую лунку после образца для тестирования.
4.Перемешать одноразовой мешалкой и распределить по всей поверхности лунки. Использовать новые мешалки на каждый образец.
5.Поставить карточки в ротатор на 2 минуты при 100 об/мин.
СЧИТЫВАНИЕ
Проверить присутствие видимой агглютинации не позднее 1 минуты после извлечения карточки из ротатора (примечание 3).
Положительные результаты: Присутствие видимых агглютинатов происходит при наличии ревматоидного фактора от ?30 МЕ/мл. Положительные сыворотки могут быть раститрованы. Для раститровки сделайте двукратные разведения сыворотки физиологическим раствором. Титром сыворотки называется максимальное разведение, показавшее положительный результат. Приблизительная концентрация РФ в образце может быть рассчитана умножением титра на 8 МЕ/мл (примечание 4).
Отрицательные результаты: Отсутствие видимой агглютинации означает концентрацию РФ менее 30 МЕ/мл
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Положительный (С+) и отрицательны (С-) контроли, включенные в набор должны тестироваться вместе с сывороткой пациентов для верификации представления метода.
Положительный (С+) контроль может показывать четко видимую агглютинацию латексных частиц.
Отрицательный (С-) не должен показывать никакой агглютинации латексных частиц.
Каждая лаборатория должна устанавливать свою собственную схему внутреннего Контроля Качества и процедуры для ее корректировки в случае, если контроль не укладывается в приемлемые пределы.
ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДА
Предел чувствительности: 30 МЕ/мл, определен при использовании внутреннего стандарта, прослеженного ВОЗ Референсного материала W1066 (международная лаборатория биологических стандартов, Амстердам). Значение cut-off может варьировать до 25%, в зависимости от неконтролируемых вариаций процедуры и опыта оператора в считывании.
Эффект зоны: Ложно отрицательные результаты, обусловленные эффектом зоны отсутствуют по крайней мере до значений РФ 800 МЕ/мл
Ложные результаты: результаты, полученные с данными реагентами не показывают значительной разницы при сравнении с референсными реагентами. Детали сравнения доступны по запросу.
Интерференции: гемоглобин (5 г/л), билирубин (15 мг/дл) и липемия (5 г/л) не влияют на результат. Другие вещества и лекарственные средства могут оказывать влияние на результат2.
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Ревматоидный фактор (РФ) является группой антител – иммуноглобулинов М (хотя IgG и IgA также описываются в литературных источниках) направленной против Fc фрагмента молекулы IgG.
РФ в основном определяется в сыворотке пациентов с ревматоидными артритами, но и другие заболевания могут также вызывать продукцию РФ: хронические воспалительные процессы, инфекционные заболевания такие как подострый бактериальный эндокардит, малярия, сифилис, проказа, лейшманиозы, туберкулез и различные аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка3-6.
Клинический диагноз не может быть основан исключительно на результатах теста, но должен учитываться в комплексе с другими клиническими и лабораторными данными.
ПРИМЕЧАНИЯ
1.Карточки теста можно использовать повторно, для этого необходимо слить биологические отходы и промыть карточку большим количеством проточной воды, не содержащей детергентов.
2.Чувствительность теста может понижаться при снижении температуры.
3.Замедление в считывании результатов может привести к ложно положительным результатам.
4.Разведение сыворотки физиологическим раствором вызывает изменение в чувствительности теста с 30 МЕ/мл до 8 МЕ/мл в связи с сильно выраженным матричным эффектом латексной агглютинации.
