RPR-Тест на сифилис
ПРИНЦИП МЕТОДА
Плазменные реагины, антитела, направленные против антигенов, производных не трепонемного происхождения, агрегируют с антигенами и вызывают коагуляцию угольных частиц1.
СОСТАВ
А. Реагент. RPR-carbon Антиген. Стабилизированная суспензия угольных частиц, покрытых липидным комплексом, азид натрия 0.95 g/L.
С+ Положительный контроль. Сыворотка человека, против нетрепонемных антигенов, азид натрия 0.95 g/L.
С- Отрицательный контроль. Сыворотка, азид натрия 0.95 g/L.
Сыворотка человека, использованная для приготовления положительного и отрицательного контролей, была протестирована и не содержит антител к ВИЧ, HCV и HBs антигену. Однако при работе следует проявлять осторожность, как с потенциально опасной сывороткой.
ХРАНЕНИЕ
Хранение при 2-8°C, за исключением слайдов и мешалок, которые могут храниться при комнатной температуре.
Реагенты и Контроли стабильны до срока годности, указанного на этикетке флаконов, при хранении плотно закрытыми и избежании загрязнения во время использования.
Показатели загрязнения:
Реагент: Видимая агглютинация во флаконе
Контроли: Присутствие взвешенных частиц.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ
А Реагент: Осторожно ресуспендировать флакон с реагентом до получения гомогенного состояния. Поместить иглу-диспенсер на кончик флакона-диспенсера и набрать всасыванием необходимый объем реагента из флакона.
Контроли готовы к использованию.
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Механический ротатор 100 об/мин.
ОБРАЗЦЫ
Сыворотка или плазма, собранные по стандартной процедуре. Стабильна 2 дня при 2-8°C.
ПРОЦЕДУРА
1. Позвольте образцам и набору принять комнатную температуру.
2. Поместите 50 мкл образца и 1 каплю контроля в различные кружки карточки теста.
3. Осторожно перемешайте флакон с Реагентом А перед употреблением. Разместите иглу-диспенсер на кончик пластикового флакона-диспенсера (примечание1). Осторожно переверните капельницу и аккуратно удалите воздушные пузырьки из иглы.
4. Расположите иглу вертикально над слайдом и добавьте 1 каплю Реагента А к каждой пробе, внутри лунки слайда.
5. Перемешайте одноразовой мешалкой смесь и распределите ее по всей поверхности лунки. Для каждой новой пробы используйте новую мешалку
6. Поместите карточки в ротатор при 100 об/мин на 8 минут.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТА
Проверьте наличие или отсутствие агглютинации в течение первой минуты после извлечения слайда из ротатора. Оценка и интерпретация результатов должны проводиться по следующим критериям:
Наблюдаемая агглютинация
Обозначение
Результат
Средние или крупные хлопья
R
положительно
Мелкие хлопья
W
Слабо положительно
Отсутствие хлопьев или нечеткое помутнение
N
Отрицательно
Положительная сыворотка может быть раститрована. Для этого сделайте серийные двукратные разведение 9 g/L солевым (физиологическим) раствором. Титр сыворотки равен наибольшему разведению, показавшему положительный результат
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Положительный С+ и отрицательный С- контроли, поставляемые в наборе, должны тестироваться совместно с образцами пациентов для верификации процедуры.
Положительный контроль С+ показывает ясно видимую агглютинацию частиц.
Отрицательный контроль С- не вызывает агглютинации частиц.
Каждая лаборатория должна устанавливать собственные схемы внутреннего контроля качества и вносить коррективы в случае, если контроль качества не укладывается в допустимые пределы.
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Аналитическая чувствительность эквивалентна таковой при использовании Референсной Человеческой Контрольной Сыворотки для нетрепонемных тестов (код BS1505) из Центра по Контролю Заболеваемости и Профилактики (CDC) Атланта. США.
Ложные результаты: Результаты, полученные с данными реагентами показывают менее 0,5 промилле RPR положительных и отрицательных данных для трепонемных тестов, то есть специфичность выше, чем 99,9% в здоровой популяции. Детали эксперимента предоставляются по запросу.
Интерференция: Гемоглобин (20 г/л) и билирубин (10 мг/дл) не влияют не результат. Ревматиодный фактор (75 МЕ/мл) и липемия (триглицериды 2,5 г/л) могут искажать результат. Другие вещества или лекарственные препараты могут также влиять не результат.
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Наличие или отсутствие реагинов в образце помогает в диагностике сифилиса. Положительный результат с нетрепонемными тестами, такими как RPR-carbon тест должен анализироваться совместно с трепонемными тестами, такими как РПГА тест для подтверждения инфекции. Ложноположительные результаты имеют место при употреблении различных лекарств, наличии других венерических заболеваний, беременности и послеродовом периоде и при аутоиммунных заболеваниях3.
Клинический диагноз не должен основываться только на данных единичного теста, а должен включать в себя как клинические, так и лабораторные данные.
ПРИМЕЧАНИЯ
1.После тестирования игла должна быть снята, промыта дистиллированной водой и высушена на воздухе. Убирайте для хранения иглу-диспенсер обратно в пластиковую упаковку.
