Тест на скрытую кровь SIGNO hemo
ПРИНЦИП МЕТОДА
При внесении образца в лунку, моноклональные антитела к гемоглобину человека, меченные коллоидным золотом, растворяются и связываются с гемоглобином, присутствующим в образце. Реакционная смесь проходит через стрип под действием капиллярных сил антительный комплекс связывается с антителами к моноклональному гемоглобину, иммобилизованным в тестовой зоне, проявляя окрашенную полоску.
Несвязанные антитела продуцируют окраску в полоске контрольной зоны, что означает специфическое представление теста 1.
СОДЕРЖАНИЕ И СОСТАВ
A.Реагент: 20. Содержит кассеты, с реакционным окошком, обработанные моноклональными антителами к гемоглобину, связанными с коллоидным золотом, иммобилизованными моноклональными антитела, иммобилизованными контрольными антителами к гемоглобину.
B.Реагент. 20х3 мл. пробирки для сбора биоматериала с буфером для экстракции. Трис буфер 50 моль/л, неионный детергент 3 г/л, азид натрия 15 ммоль/л, рН 7,4.
ХРАНЕНИЕ
Хранить при 2-30C.
Реагенты стабильны до обозначенной даты срока годности, при хранении плотно закрытым в оригинальной упаковке.
Показатели загрязнения:
Повреждения герметичности упаковки.
Присутствие полос или пятен на кассете перед началом проведения теста.
Реагент В: Присутствие взвешенных частиц.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ
Кассеты и пробирки поставляются готовыми к применению.
ОБРАЗЦЫ
Для приготовления пробы следуйте указаниям:
1.Соберите образец кала в сухой, чистый контейнер (примечание 1).
2.Отверните крышку пробирки для сбора материала и используя палочку соберите пробу из трех разных мест образца кала.
3.Удалите излишки кала с палочки, обтерев ее промокательной тканью (примечание 2).
4.Поместите палочку с пробой обратно в пробирку и плотно заверните крышку.
5.Тщательно перемешайте пробирку для полного смешивания образца с экстрагирующим буфером.
6.Образец готов для тестирования. Пробы должны быть протестированы в течение 6 часов после их получения или могут храниться 5 дней при 2-8C.
Подготовка пациента:
Образцы нельзя собирать в менструальный период, при наличии геморроидальных кровотечений или крови в моче.
Алкоголь, аспирин или избыток других препаратов могут вызывать раздражение или появление крови в желудочно-кишечном тракте. Прием подобного рода веществ прекращают за 48 часов до исследования.
Необходимо соблюдение диеты.
ПРОЦЕДУРА
1.Нагрейте кассеты и образцы до комнатной температуры (примечание 3). Если пробирки с образцами хранились при 2-8C, дайте им также принять комнатную температуру перед использованием.
2.Достаньте кассету из упаковочной фольги и разместите ее на ровной поверхности.
3.Тщательно перемешайте пробирки с образцами, держа пробирку вертикально, отломите верхушку.
4.Переверните пробирку и перенесите 7 капель экстрагированного образца (175 мкл) в окошко, помещенное «S», начните отсчет времени. Избегайте появления воздушных пузырей на поверхности окошка «S».
5.Дождитесь появления красной линии (линий).
6.Прочитайте результат 5 – 10 минут (примечание 4).
ИНЕТРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Проверьте наличие окрашенных полосок внутри окошка кассеты.
Положительный результат. Появляется две окрашенных полоски: одна в тестовом окошке «Т», другая в контрольном окошке «С». Даже если появившаяся полоска светлая, результат считается положительным. В пробах с большим содержанием гемоглобина, полоска в контрольном окошке «С» может быть очень светлой.
Отрицательный результат. Окрашенная полоска появляется только в окошке «С».
Ошибочный результат. Отсутствие окрашенных полосок или видимая окрашенная полоска появляется только в окошке «Т», но отсутствует в контрольном окошке «С». Если получен ошибочный результат, необходимо проверить образец на новой кассете
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Появление окрашенной полоски в контрольном окошке «С» означает, что коньюгат специфически мигрировал через тестовую. В высоко положительных образцах полоска может быть очень светлой, но видимой.
Каждая лаборатория должна устанавливать собственную схему внутреннего контроля качества и процедуры для корректировки своих действий в случае, если контроль не укладывается в приемлемый диапазон.
ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДА
Cut-Off: 20 нг/мл гемоглобина буфере, что соответствует приблизительному эквиваленту 10 мг гемоглобина в кале. Прослежено по Референсному материалу CRM 522 (IRMM).
Эффект прозоны: Отсутствует по крайней мере до 1000 мг/мл.
Методы сравнения:
Подробности сравнительных измерений можно получить по запросу.
- Специфичность: бычий гемоглобин (10 мг/мл), куриный гемоглобин (10 мг/мл), свиной гемоглобин (10 мг/мл), овечий гемоглобин (10 мг/мл), гемоглобин лошади (10 мг/мл), гемоглобин кролика (10 мг/мл), гемоглобин козы (10 мг/мл), железо (1 мг/мл) и аскорбиновая кислота (1 мг/мл) не влияют на исследование. Другие вещества и лекарственные препараты могут влиять на результаты теста2.
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Signo Hemo является качественным тестом для определения человеческого гемоглобина в предельно низких концентрациях, пригодных для определения скрытой крови в кале.
Гемоглобин является основным сферическим белком красных клеток крови. Гемоглобин в кале является показателем3 внутренних кровотечений, связанных с патологическими состояниями желудочно-кишечного тракта, таких как полипы толстого кишечника, колоректальная карцинома, язвенный колит и болезнь Крона.
Рак толстой и прямой кишки является одной из основных причин смерти от рака в странах запада. Колоректальные полипы на очень ранних стадиях могут не давать кровотечения. Более того, колоректальные кровотечения могут быть не постоянными, поэтому отрицательный результат не может служить основанием для исключения заболенваия.
Физиологические потери крови в кишечнике составляют менее, чем 0,5 – 2,0 мл/сутки3.
Иммунохроматографические системы являются крайне чувствительными. Они не определяют кровь из желудки и верхних отделов желудочно-кишечного тракта, так как являются более специфичными к кровотечениям из толстого кишечника или нижних отделов желудочно-кишечного тракта4.
Клинический диагноз должен основываться не на результатах единичного теста, а только на совокупности клинических и лабораторных данных.
ПРИМЕЧАНИЯ
1.Кал должен быть оттестирован в течение 6 часов после сбора, для получения лучших результатов, однако может храниться в течение 3 дней при 2-8C.
2.Сбор излишнего количества кала может привести к проблемам миграции образца на кассете и получению не объективных результатов.
3.Чувствительность теста уменьшается с понижением температуры. Лучшие результаты достигаются при температуре свыше 10C
4.Результаты, прочитанные при инкубации свыше 10 минут могут приводить к ошибкам.
